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HUVEC 人脐静脉内皮细胞永生化
HUVEC【huve-c】 | |
l 细胞鉴定 | 免疫荧光鉴定鉴定已通过 |
l 细胞来源 | 国家资源库(上海中科院) |
l 细胞背景 | 人脐静脉内皮细胞系HUVEC比较久之前由美国ATCC建系, 后来被广泛使用,但是近些年发现细胞源头存在交叉污染,目前已经被国际下架,美国也发现了细胞存在问题,于是新建一个全新的HUVE-C 但是目前这个细胞引进到国内后种子都状态很差,不能使用。因此市场上很难找到可以使用的状态好的人脐静脉内皮细胞HUVE-C细胞。本公司也是由于没有合适的细胞同时状态好也准确,所以我们做了国内原代细胞永生化建系得到一个全新的准确细胞:人脐静脉内皮细胞永生化细胞。提供单个内皮细胞marker免疫荧光鉴定。细胞叫:人脐静脉内皮细胞永生化细胞,和huve-c是同一个类型的细胞,都是属于人的脐静脉内皮细胞,只是叫法不同,并且由于是国内建系的,因此不能提供STR鉴定,而是提供免疫荧光鉴定。 |
l 细胞特性
| 1) 来源:人脐带组织 2) 形态:内皮细胞样 贴壁生长 3) 含量:>1x106 细胞数 4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 5) 用途:仅供科研使用。 |
l 培养条件: | 1)准备内皮细胞培养体系(推荐:PriMed-awcell-002) 内皮细胞培养基础培养基 93% 胎牛血清(FBS) 5% 内皮细胞培养添加剂 1% 青霉素/链霉素,P/S 1% 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 |
l 注意事项:
| 人脐静脉内皮细胞系HUVEC对于贴壁细胞传代可以参考以下方法: 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10�S的培养基来终止消化。 3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 |
l 运输形式: | 低温:(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 常温(2) T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 |
l 生物安全 | 1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。 |