l 细胞鉴定

STR鉴定已通过

l 细胞来源

国家资源库（上海中科院）

l 细胞背景

A3亚克隆来自Jurkat细胞系。 用Fas抗体处理Jurkat细胞，用有限稀释法获得一个细胞系，此细胞系对Fas介导的凋亡产生自发抗性的比例较低。 得到的亚克隆对Fas-介导的凋亡十分敏感。 挑选对新霉素具有抗性的野生型A3细胞，并三次用移码突变诱变剂ICR-191进行处理以分离具有抗Fas抗体杀伤的隐性突变体。

l 细胞特性

1） 来源：T淋巴细胞；T细胞白血病

2） 形态：淋巴母细胞,悬浮生长

3） 含量：>1x106 细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

l 培养条件：

1）准备 1640基础培养基（推荐：awcell-0002）优质胎牛血清10%，P/S 1%

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

l 注意事项：

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加*培养基来维持细胞的生长状态，一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL（不同细胞对密度要求不同，）可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3） 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

l 运输形式：

低温：（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

常温（2） T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

l 生物安全

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。