l 细胞鉴定

种属鉴定已通过

l 细胞来源

国家资源库

l 细胞背景

BALB/3T3 clone A31是1968年S.A. Aaronson和G.T. Todaro从裂解的14到17天的 BALB/c小鼠胚胎中建立的几株细胞之一。细胞分裂对接触抑制特别敏感，生长需高倍数稀释，饱和浓度低，对小鼠肉瘤病毒高度易感。

经测试并发现对 ectromelia 呈阴性病毒（鼠痘）。通过支原体检测。其重要性在于可为生命科学和生物技术领域的研究工作提供标准化的实验细胞资源及相关技术支撑。

注意：该细胞系的 STR 配置文件在 Cellosaurus 版本 30 和 31 中可用，并且源自使用 NIST 数据创建的 BioSample 条目。由于可能的错误识别/污染，此数据已被删除，因此我们也将其删除。

l 细胞特性

1） 来源：小鼠胚胎，品系：BALB/c 

2） 形态：成纤维细胞，贴壁生长

3） 含量：>1x106  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

l 培养条件：

1） 准备DMEM（推荐awcell-0001）培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

l 注意事项：

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

l 运输形式：

低温：（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

常温（2） T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

l 生物安全:

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。